一、思维导图：基因工程
二、练习
1.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与实验目的不符的是
A．用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒
B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞
C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞
D．用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
C
据图分析可知，在目的基因的两端、启动子和终止子之间都有限制性核酸内切酶EcoRⅠ的切割位点，因此可以用限制性核酸内切酶EcoRⅠ切割目的基因和运载体，之后再用DNA连接酶连接形成基因表达载体，A正确；将目的基因导入到植物细胞，常用农杆菌转化法，可以将目的基因C导入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA段，之后再用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞中染色体上的DNA上，B正确；图2中显示标记基因是潮霉素抗性基因，应该在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞，C错误；要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术，D正确。
2.某种荧光蛋白（GFP）在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病*的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5’末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______，也是为了保证__________。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了__________和___________过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的________移入牛的________中，体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定，在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞的____________（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
（1）E1和E4；甲的完整；甲与载体正确连接
（2）转录；翻译
（3）细胞核；去核卵母细胞
（4）核DNA
（1）注意题干已经说了甲是融合基因，设问又说使用了两种限制酶，所以为了保证甲的完整性，应选择E1、E4，这样同时还能保证甲与载体正确连接（避免反向链接）。（2）在该细胞中观察到了绿色的荧光，说明已经表达出了蛋白质。（3）核移植，略。（4）克隆牛利用的是细胞核移植技术，遗传物质来自于细胞核，所以用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的核DNA作为PCR模板。三、相关阅读：
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预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇易邦于年成立，已经有17年的发展，现在已经成为行业的领*企业。今天代表中国的动保企业来领奖。中国的动保企业这十几年发展速度非常快，在很多方面可以跟同行业的国外企业相媲美。易邦公司始终秉持科技创新，品质至上，为用户创造价值的理念，同时不断为用户提供优质产品，在用户里面要用得起、买得到、买得好。
以基因工程为支点，撬动技术领先的杠杆《农财宝典》新牧网记者王之娴青岛易邦生物工程有限公司董事长兼总经理杜元钊出席领奖
与两家外企共同跻身年度动保企业之列的中国本土企业，是青岛易邦。高举“易者兴邦，苗惠中国”的口号，青岛易邦生物工程有限公司经过17年的稳步发展，在成为禽苗领域的领*企业之后，近年来对猪苗领域的开拓也十分引人注目，在过去一年里的市场表现成绩斐然。
而近年来提及青岛易邦，首先想到的关键词非“基因工程”四字莫属。青岛易邦董事长兼总经理杜元钊谈到，青岛易邦将继续秉承“科技创新、品质至上”的理念，让用户“用得好、买得起、买得到”。为用户和行业提供最好的价值。
杜元钊曾在采访中表示，未来中国疫苗市场竞争将会更加激烈，而真正PK的是新型产品的研发能力，基因工程苗将是一大方向。事实上，从年首个基因工程亚单位圆环疫苗的横空出世，到猪瘟E2基因工程疫苗研发的推进，青岛易邦早已看准基因工程疫苗的潜力和前景，在基因工程疫苗的研发和布局上占得了先机。
“国内动物生物制品基因工程疫苗新兽药证书共计25个，而真正转化成产品的仅有19个，青岛易邦就拥有有7个基因工程产品，占近40%，是国内拥有基因工程产品最多的企业。”杜元钊介绍道。
与此同时，依托青岛易邦建设的“动物基因工程疫苗国家重点实验室”于年8月获得科技部“企业国家重点实验室”立项，并于年3月通过建设与运行实施方案论证，正式进入建设运行阶段。据了解，未来5年，该实验室建设期将围绕当前我国动物疫病防控面临的主要问题，集成科技创新链条，进行一体化设计，突破我国基因工程疫苗技术研究瓶颈，形成一批核心关键技术，研制一批高新技术产品，并制修订一批国家和行业标准。
对研发和技术的重视使得青岛易邦在科技创新方面走在了行业前列。目前青岛易邦拥有行业内最多的产品批准文号80个，国家新兽药注册证书29个，其中一类新兽药证书2个；授权专利82项，国家重点新产品7个，注册商标8项，获得国家科技进步二等奖1项，国家技术发明二等奖1项。
资金的投入以及各种硬件设施的配备是保证产品技术领先和品质过硬的必要条件，青岛易邦在研发上的投入也是大手笔。据杜元钊介绍，青岛易邦每年提取销售收入9%以上的资金用于研发，年为万元，年接近万。同时，青岛易邦未来将利用自身拥有的自主研发以及产学研合作两大研发平台，以基因工程亚单位疫苗技术、反向遗传技术、基因修饰技术以及活病*载体疫苗技术等四大技术为核心，向用户推出更多贴合实际需求的差异化的产品。
“以科技进化服务，以管理铸造精品，以创新引领发展”，青岛易邦志在打造精品和高端的产品，做进口疫苗的替代品。成为全国人民骄傲的民族品牌，为中国畜牧养殖业的健康发展贡献力量。
本文选自《农财宝典》畜牧版年1月刊
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