白癜风发病的机制是什么 http://news.39.net/bjzkhbzy/180423/6185488.html1.基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。（选修三8页）
2.获取目的基因是实施基因工程的第一步。（选修三8页）
3.目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来，也可以用人工的方法合成。（选修三8-9页）
4.目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。（选修三9页）
5.获取目的基因的方法目前常用的方法有：从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因或者用化学方法人工合成。（选修三9-11页）
6.将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。（选修三9页）
7.如果基因文库很大，包含了一种生物所有的基因，这种基因文库叫做基因组文库。也有一些基因文库比较小，只包含了一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库，如cDNA文库。（选修三9页）
8.从基因文库中得到我们所需的目的基因，要根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。（选修三9页）
9.将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后将这些DNA片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段。也就是说，这个群体包含了这种生物的所有基因，叫做这种生物的基因组文库。（选修三10页）
10.如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA(也叫cDNA)片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，那么，这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库。（选修三10页）
11.基因组文库与cDNA文库的主要区别
（选修三10页）
12.PCR是多聚酶链式反应的缩写。这是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过这一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。（选修三10页）
13.PCR是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加。（选修三10页）
14.利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。（选修三10页）
15.PCR扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。（选修三10页）
16.如果基因比较小，核苷酸序列又已知，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。（选修三11页）
17.基因表达载体的构建是基因工程的核心。其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。（选修三11页）
18.一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。（选修三11页）
19.启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。（选修三11页）
20.终止子使转录在所需要的地方停止下来，终止子位于基因的尾端，也是一段有特殊结构的DNA短片段。（选修三11页）
21.标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，如抗生素抗性基因。（选修三11页）
22.目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。（选修三12页）
23.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。除此之外，还有基因枪法和花粉管通道法等。（选修三12页）
24.农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。（选修三12页）
25.农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。（选修三12页）
26.如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。（选修三12页）
27.基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法。这是单子叶植物中常用的一种基因转化方法但是成本较高。（选修三12页）
28.花粉管通道法是我国科学家独创的一种十分简便经济的方法。我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的。（选修三13页）
29.花粉管通道法就是在植物受粉后花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头；然后，滴加DNA(含目的基因)使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。（选修三13页）
30.显微注射技术是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞（受精卵）的方法。（选修三13页）
31.原核生物的特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。（选修三13页）
32.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用Ca2+处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。（选修三13页）
33.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。（选修三13-14页）
34.检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键。方法是采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。（选修三14页）
35.检测目的基因是否转录出了mRNA，这是检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。检测方法采用分子杂交技术，即从转基因生物中提取的是mRNA，同样用标记的目的基因作探针，与mRNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA。（选修三14页）
36.检测目的基因是否翻译成蛋白质，是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。（选修三14页）
37.鉴定目的基因，有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。例如，一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后，是否赋予了植物抗虫或抗病特性，需要做抗虫或抗病的接种实验，以确定是否具有抗性以及抗性的程度。（选修三14-15页）
38.有的基因工程产品需要与天然产品的功能进行活性比较，以确定转基因产品的功能活性是否与天然产品相同。（选修三15页）
●DNA重组技术的基本工具
●光合作用
●光学显微镜
●稳态与环境合辑
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BiologyQuan
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